Étude La coloration par la myélopéroxidase améliore le diagnostic des maladies du sang

La coloration par myélopéroxidase (MPO), également connue sous le nom de coloration par peroxidase leucocytaire (POX), est une méthode de coloration cytochimique largement utilisée.cette technique détecte l' activité de la peroxidase intracellulaire pour aider au diagnostic des troubles hématologiques, en particulier dans la classification de la leucémie.

La coloration MPO repose sur la réaction catalytique de la peroxydase intracellulaire. Cette enzyme décompose les oxydes pour produire de l'oxygène, qui réagit ensuite avec l'iodure de potassium pour former de l'iode.L' iode se combine avec le colorant Wright-Giemsa, créant des granules colorés dans le cytoplasme qui révèlent la distribution de la peroxidase sous microscopie.permettant de les distinguer par la coloration MPO.

La coloration standard MPO nécessite des kits de réactifs spécialisés pour assurer la précision et la fiabilité.

• Solution A: solution d'éosine- Un colorant acide qui tache le cytoplasme en rouge ou rose
• Solution B: Azure II- Un colorant de base qui teint les noyaux en bleu ou violet
• Solution C: tampon PBS au iodure de potassium- Contient le substrat de réaction de la peroxydase et maintient la stabilité du pH
• Solution D: teinture Wright-Giemsa- Une teinture à double usage qui améliore la morphologie cellulaire

Les kits sont disponibles en différentes tailles (configurations de 5 tests, 20 tests et 100 tests) pour répondre à différents besoins de laboratoire.

1. Préparation de la solution de travail: Mélanger la solution C avec la solution D (généralement 1,0 ml: 250 μl).
2. Fixation de l'émail: Fixer des frottements préparés de moelle osseuse ou de sang avec du méthanol ou de l'éthanol pendant 5 à 10 minutes.
3. La teinture: Immerger les frottements fixes dans une solution de travail pendant 5 à 10 minutes, en contrôlant la température et l'humidité.
4. Rincage: Laver doucement avec de l'eau distillée ou du tampon PBS pour éliminer l'excès de tache.
5. Contre-coloration(facultatif): utiliser de l'hématoxyline pour améliorer le contraste nucléaire.
6. Séchage: Séchez à l'air ou utilisez un séchoir.
7. Microscopie: Examiner les frottements colorés pour évaluer l' activité et la distribution de la peroxidase.

L'interprétation des résultats nécessite une expertise spécialisée.

• Réaction positive: granules cytoplasmiques de couleur rouge-brun à bleu foncé (faible contre forte positivité).
• Réaction négative: Cytoplasme bleu sans granulés et noyaux uniformément violet-rouges.
• Les éosinophiles: présentent une coloration bleu foncé intense, parfois avec des cristaux en forme d' aiguille extracellulaire.

• Classification de la leucémie: Distingue la leucémie myéloïde (MPO-positive) de la leucémie lymphoïde (MPO-négative), guidant les décisions de traitement.
• Diagnostic de leucémie myéloïde aiguë: Confirme l'origine myéloïde et aide à définir le sous-type, avec des taux de positivité variables indiquant différents sous-types de LMA.
• Évaluation du syndrome myélodysplasique: Évalue la maturation et la différenciation cellulaires, avec des modèles MPO anormaux suggérant un MDS.
• Autres troubles hématologiques: Utile dans le diagnostic de la leucémie myéloïde chronique et de la myélofibrose.

• Qualité du réactif et conditions de stockage
• Respect strict du protocole
• Préparation correcte du frottis
• Durée optimale de coloration
• Évaluation microscopique par un spécialiste par un pathologiste

Les progrès technologiques continuent d'améliorer la coloration des MPO. L'immunohistochimie combine maintenant les MPO avec des marqueurs immunitaires pour une plus grande précision, tandis que la cytométrie de flux permet une détection quantitative des MPO.Comme cette méthode cytochimique classique évolue, elle promet d'apporter une contribution encore plus importante au diagnostic et au traitement hématologiques.